一、细胞基本属性
- 细胞名称：T24 人膀胱移行细胞癌细胞（STR 鉴定正确）（与 RT112、J82 同属膀胱移行细胞癌亚型，区别于 SV-HUC-1（正常输尿管上皮）、RT4（膀胱低度恶性乳头瘤），是膀胱癌高侵袭性 / 低分化亚型研究的经典模型，可与 RT112（中分化）、RT4（低度恶性）组成 “低度恶性 – 中分化 – 高侵袭性” 膀胱肿瘤梯度体系，探索膀胱癌恶性进展的分子机制）
- 细胞别称：T-24; T 24；人膀胱移行细胞癌细胞（别称以 “T” 为核心前缀，与 RT 系列（RT4、RT112）、EJ 系列（EJ-1）形成膀胱细胞株的清晰区分，简洁的数字后缀 “24” 便于实验记录及文献检索，“移行细胞癌细胞” 标注明确病理类型，贴合泌尿生殖系统肿瘤细胞株 “病理亚型 + 编号” 的精准命名体系）
- 种属来源：人
- 性别年龄：女；81 岁（明确的高龄白人女性背景，与 SV-HUC-1（11 岁男）形成极端年龄对照，与 RT4（63 岁男）、J82（58 岁男）形成 “老年女性 – 老年男性 – 中年男性” 性别年龄互补，为膀胱癌高龄发病机制、老年患者药物耐受性差异研究提供关键模型）
- 组织来源：膀胱；移行细胞癌（病理亚型明确为移行细胞癌，临床中该亚型占膀胱癌 80% 以上，T24 细胞以高侵袭性、易转移特性著称，保留移行细胞癌恶性进展后期的核心表型，可用于膀胱癌侵袭转移机制、化疗耐药性研究）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力较强但细胞间连接松散，对数生长期细胞增殖速度快（贴合短倍增时间特性），贴壁强度与 RT112 相近但低于 SV-HUC-1（正常上皮），传代时易形成单细胞悬液，适合开展侵袭、迁移等动态功能实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形或梭形，排列紊乱，核浆比显著增大，核仁明显且数量增多，具备高侵袭性膀胱癌细胞典型的恶性形态特征；与 RT112（中分化，排列规整）、SV-HUC-1（正常，铺路石样）相比，形态异形性显著，可通过形态观察快速判断细胞恶性程度及纯度，避免与正常 / 低度恶性细胞混淆）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留高侵袭性、H-ras 癌基因表达等核心特性，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致恶性表型漂移，如侵袭能力下降、癌基因表达减弱）
- 背景介绍：T24 细胞源自一位 81 岁白人女性患者的膀胱移行细胞癌组织，核心特性及应用如下：①恶性特征鲜明：倍增时间短（背景提及 19 小时，标注 20-48 小时，整体增殖速度快于多数膀胱癌细胞），含 H-ras 癌基因（膀胱癌常见驱动突变，是研究 ras 信号通路致癌机制的经典模型），表达肿瘤特有抗原，可用于癌基因功能验证、肿瘤特异性抗原相关免疫治疗研究；②特殊细胞毒性反应：来源于移行细胞癌病人的白血病和血浆对其有细胞毒性，提示该细胞可能表达患者自身免疫识别的抗原，可用于膀胱癌个体化免疫治疗靶点筛选；③应用场景：广泛用于膀胱癌高侵袭性机制研究（如上皮 – 间质转化（EMT）调控）、化疗耐药性分析（如顺铂耐药模型构建）、ras 通路靶向药物筛选，同时可与 SV-HUC-1（正常）、RT112（中分化）搭配开展 “正常 – 肿瘤”“不同恶性程度” 对比实验，验证药物对肿瘤细胞的特异性杀伤效果。
- STR 位点信息：Amelogenin：X（与女性性别匹配，可快速验证细胞性别一致性，排除交叉污染，与 RT4（X,Y）、J82（X,Y）的男性 STR 位点形成明确区分）; CSF1PO：10，12；D13S317：12；D16S539：9；D18S51：16，18；D19S433：13，14；D21S11：29；D2S1338：20，23；D3S1358：16；D5S818：10，12；D7S820：10，11；D8S1179：14；FGA：17，22；TH01：6；TPOX：8，11；vWA：17；（STR 位点含特异性杂合子位点（如 D2S1338：20，23、FGA：17，22），与 SV-HUC-1、RT112 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与保藏机构（ATCC HTB-4）数据比对，确认细胞身份及高侵袭性亚型特性）
- 生物安全等级：1（参考人源膀胱移行细胞癌细胞常规安全等级，操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，与 RT112、J82 安全操作要求一致，便于实验室统一管理多株膀胱肿瘤细胞）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，且复苏后 H-ras 基因表达、侵袭能力无显著改变，确保与其他膀胱细胞实验起始条件一致）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体，覆盖常见致病性支原体类型（如肺炎支原体、人型支原体），结果为阴性，可直接用于实验，避免支原体污染影响细胞生长及恶性表型相关实验结果）
- 保藏机构：ATCC; HTB-4，DSMZ; ACC-376；中国典型培养物保藏中心细胞库（国际权威机构（ATCC、DSMZ）与国内机构三重保藏，细胞来源可追溯性极强，基因型及高侵袭性特性经过多重验证，与 RT4（多机构保藏）、SV-HUC-1（ATCC 保藏）的保藏体系互补，便于跨地域实验协作及文献结果复现）
- 培养基：MCCOY’S 5A+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：与 RT4（膀胱低度恶性）采用相同基础培养基，区别于 SV-HUC-1（F12K）、RT112（RPMI-1640）；MCCOY’S 5A 培养基含独特的营养成分组合，适配 T24 快速增殖及高代谢需求，同时可与 RT4 开展 “同培养基 – 不同恶性程度” 对比实验，排除培养基差异对实验结果的干扰；10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中生长因子影响细胞增殖速度；PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；与 SV-HUC-1、RT4、RT112 等泌尿生殖系统相关细胞培养条件完全一致，确保 “正常 – 肿瘤”“不同恶性程度” 对照实验环境的统一性）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作流程：①对数生长期细胞消化离心，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞，适配快速增殖特性）；②分装后 4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（建议用程序降温盒，减少低温对恶性表型的影响）→-80℃过夜→转入液氮；复苏时 37℃水浴 1 分钟内融化，离心去除冻存液，用预热的 MCCOY’S 5A 培养基重悬，避免 DMSO 对细胞的毒性影响）
- 倍增时间：~20-48 hours（增殖速度范围宽但整体偏快，平均倍增时间接近背景提及的 19 小时，对数生长期为接种后 1-2 天，需每天镜检细胞密度，待密度达 70% 时立即传代（避免过度密集导致细胞脱落）；与 RT112（中分化，倍增时间适中）、RT4（低度恶性，倍增时间较长）形成 “快 – 中 – 慢” 增殖梯度，适合开展药物作用时效对比实验）
- 致瘤性：Yes, in hamster cheek pouch. No, in nude mice.（致瘤性具有物种特异性：仅在仓鼠颊囊中成瘤，裸鼠中不成瘤，与 RT112（裸鼠成瘤）、RT4（类固醇处理仓鼠成瘤）的致瘤特性形成差异，可用于研究肿瘤微环境（如物种特异性免疫细胞）对成瘤的影响，同时为膀胱癌动物模型构建提供物种选择参考）
- 抗原表达情况：HLA A1, A3, B18, Bw35, Cw4, DRw2, Dw4（明确的 HLA 抗原分型，覆盖 I 类及 II 类 HLA 分子，可用于肿瘤免疫研究（如 T 细胞识别、免疫检查点抑制剂筛选），与 SV-HUC-1（尿路上皮特异性抗原）、RT4（HLA A25 等）的抗原表达谱形成对比，为免疫治疗靶点的亚型特异性研究提供数据）
- 基因表达情况：tumor specific antigen（肿瘤特有抗原，可作为膀胱癌诊断及治疗的靶点）, HLA A1, A3, B18, Bw35, Cw4, DRw2, Dw4（基因表达覆盖肿瘤标志物与免疫相关分子，可通过 RT-PCR 或 Western Blot 检测验证细胞恶性表型稳定性，同时为膀胱癌基因治疗（如靶向肿瘤特有抗原的 CAR-T 细胞治疗）提供候选靶点）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存充足，所有现货细胞均经过 MCCOY’S 5A 培养基适应性培养、H-ras 基因表达检测及增殖速度验证，确保高侵袭性移行细胞癌特性稳定，下单后 48 小时内可安排发货，可与 RT112、SV-HUC-1 同步下单，保障 “正常 – 肿瘤” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用恒温泡沫箱内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，确保运输过程中温度波动不超过 ±2℃，到达后建议立即放入 37℃培养箱，因增殖速度快，24 小时后需观察细胞密度，必要时提前传代）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及恶性表型漂移风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途，使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》《医学科研伦理审查办法》等相关法规及伦理要求；实验废弃物需经高压灭菌（121℃，30 分钟）处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①培养基与传代：严格使用 MCCOY’S 5A 培养基，不可与 SV-HUC-1 的 F12K、RT112 的 RPMI-1640 混用；因增殖速度快，传代间隔建议 1-2 天，消化时用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 1-2 分钟（短于 RT4、RT112），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎（保护细胞侵袭相关表面结构）；②恶性表型实验设计：开展侵袭实验时，建议使用 Matrigel 包被 Transwell 小室，接种密度 5×10⁴cells / 孔，培养 24 小时后计数穿膜细胞（因增殖快，需缩短培养时间），设置 SV-HUC-1（正常对照）、RT112（中分化对照）；研究 H-ras 基因功能时，可通过 siRNA 干扰 H-ras 表达，检测细胞增殖、侵袭能力变化，验证其致癌作用；③致瘤性实验注意事项：开展动物成瘤实验时，需选择仓鼠（如叙利亚仓鼠）而非裸鼠，接种部位为颊囊，接种密度建议 1×10⁶cells / 只，成瘤观察周期 2-3 周，同时设置 RT112（裸鼠对照），对比物种特异性差异；④药物筛选优化：因倍增时间短，药物处理周期建议 48 小时（短于 RT4 的 72 小时），通过 CCK-8 法检测细胞活性，计算 IC50 值；开展耐药性实验时，可通过逐步提高顺铂浓度构建耐药株，与亲本株对比耐药相关基因（如 ABCB1）表达差异；⑤污染防控与表型监测：实验操作在超净工作台内进行，MCCOY’S 5A 培养基、耗材单独存放，避免与 SV-HUC-1 的正常细胞培养基交叉使用，防止细胞交叉污染；长期培养中，每 3 代检测 H-ras 基因表达及增殖速度，若发现表达下降或增殖减慢，需立即更换低代数种子细胞，确保实验结果可靠。
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