一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）

核心操作注意事项

1. 传代处理完成后，将细胞放入 37℃、5% CO₂培养箱中；
2. 后续 24-48 小时内尽量不移动培养瓶，确保细胞稳定贴壁与展开，减少外界干扰导致的贴壁失败。

背景与筛选验证

• 背景介绍：
  1. 细胞稳定表达萤火虫荧光素酶（FLUC），性状稳定，无需抗生素常规维持，可作为荧光素酶活性检测的阳性对照，也适用于活体动物成像实验。
  2. 通过慢病毒转染携带 Luc 基因，亲本 T-47D 细胞分离自 54 岁乳房侵入性导管癌女性患者胸水，是乳腺癌研究中常用的激素敏感性细胞株。
  3. 该细胞具备明确功能特征：属于分化的上皮亚株，有细胞质连接；表达 17-β- 雌二醇受体、其他类固醇降血钙素受体及 WNT7B 癌基因，适用于乳腺癌激素调控机制、癌基因功能及药物筛选相关研究。
• puro 药筛浓度：T47D-FLUC 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。通过嘌呤霉素筛选可去除未转染细胞，低浓度维持能保障 Luc 基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁能力及激素受体表达。

细胞培养核心信息

• 生物安全等级：1 级，操作风险低，符合常规实验室生物安全管理要求，无需特殊防护。
• 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装。
• 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、荧光素酶活性及乳腺癌激素相关实验结果，保障数据准确性）。
• 保藏机构：ATCC; HTB-133、DSMZ; ACC-739、ECACC; 85102201（细胞来源可追溯，确保细胞株稳定性与激素敏感性可靠性）。
• 培养基：RPMI-1640 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+ PS（青霉素 – 链霉素双抗）+ 0.2 Units/ml 牛胰岛素（也可使用人胰岛素）+ 0.5μg/ml puro（含胰岛素的专用配方适配细胞营养需求，维持激素受体功能与 Luc 基因稳定）。
• 培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整）。
• 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存前确保细胞充分贴壁且状态良好，可适当延长冻存前培养时间，保障复苏后活性与荧光表达稳定）。
• 细胞货期：现货，1 周左右。
• 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递。
• 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。