THP-1-AP-1-Nluc-puro

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THP-1-AP-1-Nluc-puro

原价为:¥12,000.00。当前价格为:¥10,000.00。

类别:

一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)

细胞名称:THP-1-AP-1-Nluc-puro, 人单核细胞白血病细胞(AP-1 为信号通路报告基因,NLUC 为纳米荧光素酶,可监测通路活性;带 puro 抗性)

种属来源:人

组织来源:急性单核细胞白血病

生长特性:悬浮生长(无需贴壁,关注密度与分散状态)

细胞形态:圆形,单个或呈片

特别注意:puro 药筛浓度 1.0μg/ml(去除未转染细胞),培养用 0.5μg/ml 维持;培养基需加 0.05 mM 2 – 巯基乙醇

细胞代数:10 代以内(低传代,保 AP-1 通路活性、NLUC 表达及白血病细胞特性)

细胞规格:1×10⁶cells/T25 瓶或 1mL 冻存管

支原体检测:阴性(无污染,保障实验准确性)

验证相关:含 PMA 激活验证实验(用于确认 AP-1 通路响应性)、AP-1 信号通路示意图(6.png,辅助实验设计)

背景与核心价值

背景介绍

THP-1-AP-1-Nluc-puro 细胞为 THP-1 人单核细胞白血病细胞构建的 AP-1 通路报告细胞株,稳定整合 AP-1 调控的 NLUC 报告基因并带 puro 抗性。可通过 NLUC 荧光强度变化,实时监测 AP-1 信号通路激活或抑制情况,适用于炎症、肿瘤相关通路机制研究、药物筛选(如靶向 AP-1 通路的药物)。

关键特性

  1. 通路报告功能:AP-1 通路激活时 NLUC 表达增强,荧光信号可量化,精准反映通路活性;
  2. 细胞特性:保留 THP-1 细胞单核细胞特性,可经 PMA 诱导分化,适配多种功能实验。

培养与冻存

基础信息

培养基:RPMI-1640+10% FBS+PS+0.05 mM 2 – 巯基乙醇(2 – 巯基乙醇为必需成分,不可省略),按需加 0.5μg/ml puro;

培养条件:95% 空气 + 5% CO₂,37℃,湿度 90% 左右;

冻存条件:无血清冻存液(推荐 IMC-701),液氮储存。

操作要点

  1. 密度控制:适宜密度 5×10⁵-1×10⁶cells/mL,每日监测,达上限按 1:2-1:3 稀释传代,避免过度密集;
  2. 2 – 巯基乙醇管理:需新鲜添加,避免反复冻融影响活性;
  3. PMA 激活实验:进行通路验证时,按实验方案加 PMA 诱导,通过 NLUC 荧光检测通路激活情况;
  4. 冻存:取对数期细胞,离心后用含 2 – 巯基乙醇、puro 的培养基重悬,密度 2×10⁶-5×10⁶cells/ml,梯度降温;
  5. 复苏:37℃速融,离心后用新鲜培养基重悬,24h 查存活率,后续可通过 PMA 激活验证通路功能。

货期与运输

细胞货期:现货,1 周左右;

运输方式:复苏发货(T25 瓶,免运费)/ 冻存发货(加干冰,需付费),顺丰;

运输注意:复苏防震防细胞聚集,冻存确保干冰充足维持低温。

供应限制

仅限科学研究,不可用于动物 / 人类疾病治疗。

评价

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