一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：THP-1-NFAT-Nluc-puro, 人单核细胞白血病细胞（NFAT 为活化 T 细胞核因子，NLUC 为纳米荧光素酶，可监测 NFAT 通路活性；带 puro 抗性）
种属来源：人
组织来源：急性单核细胞白血病
生长特性：悬浮生长（无需贴壁，关注密度与分散状态）
细胞形态：圆形，单个或呈片
特别注意：puro 药筛浓度 1.0μg/ml（去除未转染细胞），培养用 0.5μg/ml 维持；培养基需加 0.05 mM 2 – 巯基乙醇（必需成分，不可省略）
细胞代数：10 代以内（低传代，保 NFAT 通路响应性、NLUC 活性及白血病细胞特性）
细胞规格：1×10⁶cells/T25 瓶或 1mL 冻存管
支原体检测：阴性（无污染，保障实验准确性）
验证相关：含 PMA 激活验证实验（用于确认 NFAT 通路活性）、NFAT 信号通路示意图（NFAT-1.png，辅助实验设计）
背景与核心价值
背景介绍
THP-1-NFAT-Nluc-puro 细胞是 THP-1 人单核细胞白血病细胞构建的 NFAT 通路报告细胞株，稳定整合 NFAT 调控的 NLUC 报告基因并带 puro 抗性。可通过 NLUC 荧光强度变化，实时量化 NFAT 信号通路的激活或抑制情况，适用于免疫应答、炎症反应、肿瘤微环境调控机制研究，及靶向 NFAT 通路的药物筛选（如免疫抑制剂、抗炎药）。
关键特性
- 通路报告功能：PMA 诱导 NFAT 通路激活时，NLUC 表达增强，荧光信号可精准反映通路活性；
- 细胞特性：保留 THP-1 细胞单核细胞属性，可适配单核细胞分化、免疫细胞互作等关联实验，拓宽研究场景。
培养与冻存
基础信息
培养基：RPMI-1640+10% FBS+PS+0.05 mM 2 – 巯基乙醇，按需添加 0.5μg/ml puro；
培养条件：95% 空气 + 5% CO₂，37℃，湿度 90% 左右；
冻存条件：无血清冻存液（推荐 IMC-701），液氮储存。
操作要点
- 密度控制：适宜密度 5×10⁵-1×10⁶cells/mL，每日监测，密度达上限时按 1:2-1:3 比例稀释传代，避免过度密集导致活性下降；
- 2 – 巯基乙醇管理：需新鲜添加至培养基，避免反复冻融失效，保障细胞正常生长；
- PMA 激活实验：开展通路验证时，按实验方案加入 PMA 诱导，通过荧光检测仪器监测 NLUC 信号变化，确认通路响应性；
- 冻存：取对数期细胞，1000rpm 离心 5 分钟收集，用含 2 – 巯基乙醇、puro 的培养基清洗后重悬，密度调至 2×10⁶-5×10⁶cells/ml，梯度降温冻存；
- 复苏：37℃水浴速融，离心弃冻存液，用新鲜培养基重悬；24h 后检测细胞存活率（台盼蓝染色，存活率≥80%），后续可通过 PMA 激活实验验证通路功能。
货期与运输
细胞货期：现货，1 周左右；
运输方式：复苏发货（T25 瓶，免运费）/ 冻存发货（加干冰，需付费），顺丰；
运输注意：复苏发货用防震包装减少震荡，避免细胞聚集；冻存发货确保干冰充足，维持低温状态。
供应限制
仅限科学研究，不可用于动物 / 人类疾病治疗。
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