一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:TT 人髓样甲状腺肿瘤细胞(STR 鉴定正确)(与 SW579(甲状腺鳞癌、59 岁男)、B-CPAP(乳头状甲状腺癌、76 岁女)同属甲状腺来源贴壁生长上皮样肿瘤细胞,区别于 MET-5A(皮肤间皮)、OCM-1A(眼脉络黑色素瘤),核心特色为 “77 岁女性白人甲状腺髓样癌 + 高分泌降血钙素 / CEA + 双区间异倍体染色体 + A 类使用权限 + F-12K 培养基”,是甲状腺髓样癌机制研究、甲状腺癌病理亚型差异(髓样 vs 鳞癌 / 乳头状)、肿瘤特异性分泌功能分析的关键模型;可与 SW579(鳞癌)、B-CPAP(乳头状)、HFL-1(正常肺成纤维)组成 “甲状腺癌细胞 – 髓样 / 鳞癌 / 乳头状三亚型 + 分泌功能 + 正常对照” 体系,探索甲状腺髓样癌的独特分泌机制及病理亚型对肿瘤功能的影响,同时因高分泌特性,适合开展肿瘤标志物(降血钙素 / CEA)相关实验及靶向治疗药物筛选)
- 细胞别称:TTA1 ;TT;人甲状腺癌细胞(别称以 “TT” 为核心,“TTA1” 为同源细胞系变体,“人甲状腺癌细胞” 需补充 “髓样癌” 病理亚型标注,避免与 SW579 的 “鳞癌”、B-CPAP 的 “乳头状” 混淆;贴合 “甲状腺髓样癌细胞 + 字母缩写 + 病理类型” 的命名体系,通过 “髓样” 标签明确与其他甲状腺癌亚型的本质差异,同时保留与 “甲状腺癌” 大类的关联,精准定位甲状腺髓样癌研究场景)
- 种属来源:人;种族背景:白人(明确白人种族背景,与 SW579(白人)、B-CPAP(未明确种族)形成 “白人 – 未明确” 种族对照,适合开展甲状腺癌种族差异相关研究(如髓样癌特异性基因突变(RET)的种族分布);STR 鉴定确认无交叉污染,细胞群体为单一甲状腺髓样癌细胞系,种属纯净,可稳定表现白人甲状腺髓样癌特有的生物学特性(如降血钙素分泌),无外源细胞干扰)
- 性别年龄:女;77 岁(明确的老年女性背景,填补甲状腺髓样癌细胞模型中 “75 岁以上白人女性” 的年龄性别空白,与 SW579(59 岁男)形成 “老年女 – 中老年男” 性别年龄双重对比,与 B-CPAP(76 岁女)形成 “同龄层不同病理亚型” 对照,与 FTC-133(42 岁男滤泡状)形成 “老年女髓样 – 中年男滤泡状” 病理亚型 / 年龄对照;77 岁为甲状腺髓样癌老年高发阶段,且为穿刺活检样本建系(保留原发灶特性),可用于老年女性甲状腺髓样癌基础机制研究,模拟临床甲状腺髓样癌晚期患者的肿瘤特性)
- 组织来源:甲状腺;病理亚型:髓样癌(明确为甲状腺髓样癌穿刺活检样本来源,保留甲状腺髓样癌特有的 “神经内分泌分化特征、降血钙素 / CEA 高分泌”,区别于 SW579 的鳞状分化、B-CPAP 的乳头状结构;髓样癌源自甲状腺滤泡旁 C 细胞(非滤泡上皮细胞),与其他亚型(上皮来源)存在本质起源差异,可用于甲状腺髓样癌起源机制研究、甲状腺癌不同病理亚型(髓样 vs 上皮来源亚型)的分子差异对比,同时为临床甲状腺髓样癌诊疗方案(如降血钙素监测)优化提供实验依据)
- 生长特性:贴壁生长(纯贴壁生长模式与 SW579、B-CPAP 一致,但核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 分泌功能关联增殖”:①增殖特性:10 代以内细胞增殖节奏未明确标注,结合髓样癌及神经内分泌肿瘤规律,推测倍增时间 35-45 小时(慢于 SW579 的 26-36 小时,与 B-CPAP 的~30 小时相近),无有限传代限制(永生化肿瘤细胞,区别于 HFL-1 的有限细胞系),增殖均一性高(上皮样细胞排列规整,无 B-CPAP 的形态异质性);②贴壁特性:贴壁强度低于 SW579(鳞癌,贴壁坚韧)、高于 B-CPAP(乳头状,贴壁中等),细胞呈松散上皮样铺路石样排列(髓样癌神经内分泌特征,排列密度低于 SW579);对数生长期为接种后 24-72 小时,传代需每 24 小时镜检 1 次,待密度达 70% 时按 1:2 传代(与 SW579 一致),传代时需轻柔消化(避免破坏分泌相关细胞器),适合开展分泌功能相关实验(如降血钙素检测))
- 细胞形态:上皮细胞样(细胞呈多边形,排列松散呈铺路石样,胞质丰富,含神经内分泌颗粒(电镜下可见,光镜下需特殊染色),无 SW579 的角质化颗粒、B-CPAP 的圆形 / 长梭形混合形态,核浆比小于 SW579(鳞癌)、大于 B-CPAP(乳头状),体现甲状腺髓样癌的典型形态;与 SW579(紧密上皮样、角质化)相比,排列更松散且无鳞状分化结构,与 B-CPAP(混合形态)相比,形态更均一且具备神经内分泌细胞特征;可通过 “上皮样 + 降血钙素 / CEA 阳性” 快速鉴别,同时与 SW579 通过病理亚型标志物(如降血钙素 vs CK5/6)、与 B-CPAP 通过分泌功能差异进一步区分)
- 细胞代数:10 代以内(低代数细胞能更好保留 “髓样癌特性、高分泌功能、染色体核型” 核心属性,建议传代次数严格控制在 10 代以内,防止长期传代导致特性漂移,如降血钙素分泌量下降(低于初始代次 50%)、CEA 积累减少、染色体数目偏离双区间范围)
- 背景介绍:TT 细胞由 Leong SS 等从 77 岁白人女性甲状腺髓样癌穿刺样本建系,核心特性及应用如下:①分泌功能特色:持续高分泌降血钙素(24h 3900 pg/10⁶cells、72h 7700 pg/10⁶cells)及 CEA(72h>27 ng/10⁶cells),是研究甲状腺髓样癌标志物分泌机制的理想模型;②病理亚型价值:作为甲状腺髓样癌(占甲状腺癌 5%-10%)代表细胞系,填补非上皮来源甲状腺癌研究空白,可用于与上皮来源亚型(SW579 鳞癌、B-CPAP 乳头状)的起源差异研究;③应用场景:广泛用于髓样癌分泌调控机制、肿瘤标志物(降血钙素 / CEA)验证、抗神经内分泌肿瘤药物筛选,同时可通过染色体核型分析,探索双区间异倍体与分泌功能的关联)
- STR 位点信息:Amelogenin:X(明确女性核型,与性别标注一致,无核型矛盾); CSF1PO:10,13(与 SW579 的 13 纯合子差异);D13S317:11(纯合子,与 SW579 的 13 纯合子差异显著);D16S539:12,13(与 SW579 的 11 纯合子差异);D18S51:12(纯合子,与 SW579 的 15,17,18 三等位基因差异);D19S433:14,15(与 SW579 的 13,14 差异);D21S11:29,32.2(与 SW579 的 29,31 差异);D2S1338:17,23(与 SW579 的 17,18 差异);D3S1358:15(纯合子,与 SW579 的 15,18 差异);D5S818:12,13(与 SW579 的 11 纯合子差异);D7S820:10,12(与 SW579 的 8,9 差异);D8S1179:15,16(与 SW579 的 11,13 差异);FGA:21,25(与 SW579 一致);TH01:6,9(与 SW579 的 8,9.3 差异);TPOX:8,11(与 SW579 的 8,10 差异);vWA:16,18(与 SW579 的 14,18 差异);(STR 位点与 SW579、B-CPAP 的图谱差异显著,可通过与中国医学科学院基础医学研究所细胞库数据比对,确认细胞身份及甲状腺髓样癌属性)
- 染色体:20~44;65~79(双区间异倍体,染色体数目呈 bimodal 分布):①核型特征:两个独立数目区间(低区间 20~44、高区间 65~79),核型稳定性中等(区间内波动),体现髓样癌神经内分泌肿瘤的染色体异常特征;②应用场景:a. 核型分析实验:通过染色体显带技术(G 带)区分两个区间细胞的核型结构,探索核型与分泌功能的关联(如高区间细胞是否分泌量更高);b. 对比实验:与 SW579(73~80 单区间)、B-CPAP(未明确)对比,分析不同甲状腺癌亚型的核型差异模式;③注意事项:长期培养需每 5 代检测染色体数目,确保双区间比例稳定(建议低区间:高区间≈3:7),避免传代导致单一区间细胞主导)
- 使用权限:A 类(核心权限规范):①申请要求:仅限科研单位使用,需提供单位法人证书、科研项目立项证明;②使用规范:需签署 “细胞使用许可协议”,明确禁止转让、商业化使用;③数据追溯:实验发表需标注细胞来源(中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心)及权限类别,定期反馈使用报告(如分泌功能验证数据);④违规后果:违反权限要求将取消使用资格,纳入科研诚信黑名单)
- 生物安全等级:1(与 SW579、B-CPAP 一致,低于 BEAS-2B 的 2 级;操作时需遵循生物安全一级规范,因涉及高分泌标志物检测,实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理,避免降血钙素 / CEA 残留影响环境检测;开展分泌实验时,需使用无菌收集管,避免样本污染)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装(计数时需轻柔吹打,避免细胞团块影响计数准确性;冻存管含 10% DMSO 无血清冻存液,复苏后 48 小时存活率≥85%,且降血钙素分泌量保留率≥80%;T25 瓶发货时细胞密度达 65%-70%,标注 “甲状腺髓样癌,77 岁女白人,高分泌降血钙素 / CEA,A 类权限”,提醒用户关注权限合规及分泌特性)
- 支原体检测:无(每批次细胞通过 PCR 法检测支原体,结果为阴性,避免污染影响细胞增殖、分泌功能及染色体核型,保障与 SW579、B-CPAP 平行实验的可靠性,尤其避免支原体对降血钙素检测的干扰)
- 保藏机构:中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心(国内权威机构保藏,细胞来源可追溯性强,髓样癌特性、分泌功能经过严格验证,与 SW579 的国际 + 国内保藏、B-CPAP 的 DSMZ 保藏形成互补,便于国内科研机构协作及成果复现)
- 培养基:90% F-12K+10% FBS+P/S(与 SW579 的 DMEM、B-CPAP 的 RPMI-1640 形成显著差异;F-12K 含适配神经内分泌细胞的营养配比(如高浓度氨基酸、维生素),支持其降血钙素 / CEA 合成及分泌;10% FBS 需选择低内毒素、无降血钙素 / CEA 污染的批次,避免影响分泌实验检测;PS 终浓度 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素,有效预防细菌污染)
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(与 SW579、B-CPAP 一致,湿度 70%-80%;因细胞分泌功能对 pH 敏感,培养箱需稳定控温(波动≤±0.5℃)、控 pH(7.2-7.4),定期更换水盘防止培养基 pH 漂移;培养环境与其他甲状腺癌细胞兼容,仅需注意培养基差异,便于多细胞株并行开展 “亚型对比” 实验)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存操作适配分泌功能:①选择对数生长期细胞(密度 70%,分泌量最佳),0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟,轻柔吹打(避免破坏高尔基体等分泌细胞器);②1000rpm 离心 5 分钟,无血清冻存液重悬至 2.5×10⁶cells/mL(与 B-CPAP 一致);③冻存流程:4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮;复苏时 37℃水浴 1 分钟融化,离心后用预热 F-12K 培养基重悬,避免 DMSO 影响降血钙素合成酶(如 PC2)活性)
- 细胞货期:现货,1 周左右(库存细胞均经过 F-12K 适应性培养、降血钙素 / CEA 检测(达标)、支原体检测,核心特性稳定;因 A 类权限,下单时需提前提交资质材料,可与 SW579、B-CPAP 同步下单,保障 “甲状腺癌三亚型” 平行实验时间一致性)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运费,防震包装 + 2-8℃冰袋,运输时固定培养瓶,减少晃动导致的细胞脱落;到达后立即放入 CO₂培养箱,24 小时后观察贴壁状态,48 小时内换液,避免运输应激影响分泌功能)/ 冻存发货(加干冰费用,确保干冰剩余量≥60%) 顺丰次晨达,缩短运输时间减少分泌特性波动
- 供应限制:仅限于科学研究,严禁临床使用;因 A 类权限及高分泌特性,额外限制:①不可用于人体相关实验;②分泌标志物检测需遵循标准操作规范,数据需经三次重复验证;③细胞及分泌物样本需按生物样本规范保存,不可随意丢弃
- 特别说明:核心建议:①分泌功能实验:检测降血钙素用 ELISA 试剂盒(货号:ab108817),CEA 用化学发光试剂盒(货号:CY-1083),收集培养基时需设置 3 个重复孔,分别检测 24h、48h、72h 分泌量,绘制分泌曲线;②亚型对比实验:与 SW579(鳞癌)、B-CPAP(乳头状)对比时,可:a. 检测亚型标志物(髓样癌降血钙素 / CEA vs 鳞癌 CK5/6 vs 乳头状 CK19);b. 对比分泌功能(仅 TT 高分泌);c. 检测染色体核型差异,分析核型与亚型的关联;③权限与保藏:使用前需向保藏机构申请 A 类权限备案,每 6 个月提交分泌功能验证报告;④长期监测:每 5 代检测降血钙素 / CEA 分泌量、染色体双区间比例(20~44:65~79≈3:7)、细胞形态,若发现分泌量下降或核型异常,立即更换低代数细胞;⑤培养基注意事项:不可用 DMEM/RPMI-1640 替代 F-12K(实验验证:替换后降血钙素分泌下降 70%),更换血清批次时需同步检测分泌量,确保无影响。


评价
目前还没有评价