一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:U87-MG-FLUC-eGFP-puro 人脑星形胶质母细胞瘤细胞 (FLUC/eGFP 双标)(STR 鉴定正确)
细胞别称:U87-MG-LUC-EGFP;人脑星形胶质母细胞瘤 – 荧光素酶标记 – EGFP;人脑星形胶质母细胞瘤 – LUC-EGFP
种属来源:人
组织来源:脑
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
细胞代数:未明确标注,建议优先选择低传代细胞(如 p3-p10),以更好维持 FLUC/eGFP 双荧光标记稳定性及人脑星形胶质母细胞瘤特有的成瘤特性
生物安全等级:1 级
背景与筛选验证
背景介绍
U87-MG-FLUC-eGFP-puro 细胞稳定共表达萤火虫荧光素酶(FLUC)与增强型绿色荧光蛋白(eGFP),性状稳定,培养时无需抗生素常规维持。既可作为双荧光活性检测的阳性对照,也适用于人脑星形胶质母细胞瘤体内成像实验(如裸鼠皮下成瘤、脑原位成瘤模型的双荧光追踪)。该细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因,亲本 U-87 MG 细胞由 Ponten・J 等建立,源于恶性神经胶质瘤,且裸鼠皮下接种可成瘤,是研究人脑星形胶质母细胞瘤发病机制、抗肿瘤药物筛选的经典细胞株。
puro 药筛浓度
U87-MG-LUC-EGFP 细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 1.0μg/ml,用于去除未转染细胞;培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障双荧光基因稳定表达,同时不影响细胞贴壁生长及裸鼠成瘤特性。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装;
- 支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、双荧光表达及星形胶质母细胞瘤相关实验结果,保障数据准确性);
- 保藏机构:ATCC; HTB-14、ECACC; 89081402(细胞来源可追溯,确保细胞株稳定性与恶性神经胶质瘤特性可靠)。
培养与冻存
- 培养基:90% DMEM 培养基 + 10% FBS(胎牛血清)+PS(青霉素 – 链霉素双抗)+1.0μg/ml puro(仅药筛阶段按此浓度添加,常规培养建议用 0.5μg/ml puro 维持,适配贴壁生长的脑星形胶质母细胞瘤细胞营养需求);
- 培养条件:气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳,温度 37℃;避免强光直射,减少 eGFP 光漂白,保障双荧光观测效果;操作时动作轻柔,避免频繁移动影响细胞贴壁状态;
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存;冻存前确保细胞处于对数生长期,保留双荧光特性与成瘤能力;可适当提高冻存密度,减少复苏损伤,复苏后优先观察细胞贴壁情况与双荧光表达。
货期与运输
- 细胞货期:现货,1 周左右;
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;运输过程需尽量减少颠簸,降低细胞脱落概率。
供应限制
仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;若开展脑原位成瘤实验,需提前优化细胞接种方法与动物模型构建参数,以匹配脑部肿瘤研究需求。


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