一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:WI-38 人胚肺成纤维细胞
核心特色:妊娠 3 个月女性胚胎正常肺组织来源 + 贴壁生长 + 成纤维细胞形态 + MEM+10% FBS+1% 双抗培养基 +~24 小时短倍增 + 首株疫苗制备用二倍体细胞系 + TNF alpha 促生长 + 10 代以内代数,可与 MRC-5(14 周龄男胚肺 / MEM/36-96h 倍增 / 46,XY)、JEG-3(男性绒毛膜癌 / MEM/24-36h 倍增 / 超三倍体)组成 “细胞类型(正常胚肺细胞 – 正常胚肺细胞 – 滋养层肿瘤)+ 性别胎龄(女 / 3 月 – 男 / 14 周 – 男 / 无)+ 功能特性(疫苗制备 / TNF 促生长 – 正常增殖 – 激素分泌)+ 倍增差异(24h-36-96h-24-36h)+ 遗传特征(二倍体 – 二倍体 – 超三倍体)” 对比体系,用于胚胎肺成纤维细胞机制、疫苗制备细胞模型特性、TNF alpha 调控机制及正常细胞性别 / 胎龄差异研究。
- 细胞别称:Wi-38; WI 38; WI38; Wistar Institute-38; AG06814-J; AG06814-M; AG06814-N;人胚肺成纤维细胞
标注 “女胚肺成纤维细胞 + 疫苗制备用 + TNF 促生长 + 短倍增”,区别于 MRC-5 的 “男胚肺 + 正常二倍体 + 宽倍增”、JEG-3 的 “绒毛膜癌 + 激素分泌 + 超三倍体” 标识,凸显女性胚胎属性及疫苗应用价值,规避与同类正常肺细胞的性别 / 功能混淆。
- 种属来源:人(无交叉污染风险,种属纯净,保障正常胚肺成纤维细胞特有的贴壁能力、成纤维形态、MEM 培养基适应能力、二倍体核型及 TNF alpha 响应性稳定,与 MRC-5、JEG-3 的种属来源一致,无肿瘤细胞恶性特征,具疫苗制备合规性,适配疫苗研发、药物毒性对照及胚胎发育相关实验场景)
- 性别年龄:女;妊娠 3 个月(早期胚胎阶段,填补女性早期胚胎肺细胞模型空白,与 MRC-5 的 “14 周龄男” 形成 “女 – 男” 性别差异、“3 月 – 14 周” 胎龄梯度(3 月≈12 周,接近但略早),与 JEG-3 的 “男性无明确年龄” 形成 “女性胚胎 – 男性肿瘤” 对比,适配女性胚胎肺发育机制、性别相关肺疾病基础研究,尤其适合疫苗生产工艺验证及药物安全性评价的正常细胞对照)
- 组织来源:正常肺(早期胚胎肺组织,与 MRC-5 的 “14 周龄胎儿肺” 同属正常胚肺但胎龄 / 性别不同,区别于 JEG-3 的 “绒毛膜癌”,保留胚胎肺成纤维细胞特有的增殖分化潜力及疫苗制备适配性,无 MRC 的部分亚二倍体特征,新增 TNF alpha 促生长特性,适配疫苗生产及细胞因子调控机制研究)
- 生长特性:贴壁生长(核心生长特性与 MRC-5、JEG-3 一致,便于平行实验操作)
① 倍增时间~24 小时(明确短倍增,远快于 MRC-5 的 36-96 小时,与 JEG-3 的 24-36 小时下限持平,适配早期胚胎细胞快速增殖节奏,疫苗生产及实验周期更短);② 需胰酶消化(0.25% 胰酶 + 0.02% EDTA,37℃孵育 4-6 分钟),细胞汇合度达 75%-85% 时按 1:3-1:4 传代,因成纤维细胞形态贴壁紧密但短倍增需高频传代,消化时间需短于 MRC-5(避免过度消化);传代后 24 小时内贴壁稳定,添加 TNF alpha(推荐浓度 10ng/mL)可使倍增时间缩短至 20 小时左右,增殖效率显著高于 MRC-5。
- 细胞形态:成纤维细胞(核心形态差异,呈典型梭形,胞质延伸形成均匀细长突起,排列呈平行或漩涡状,与 MRC-5 的 “成纤维细胞样(梭形 + 放射状排列)” 形态相近,区别于 JEG-3 的 “上皮样细胞(多边形 + 分泌颗粒)”,可通过 “女性胚胎来源 + TNF 促生长 + 疫苗应用” 快速鉴别,早期胚胎来源使其形态更规整、大小更均一,适配疫苗生产的细胞均一性要求)
- 细胞代数:10 代以内(避免贴壁能力下降、成纤维形态漂移、二倍体核型异常及 TNF alpha 响应性丢失,与 MRC-5、JEG-3 的代数要求一致;因早期胚胎细胞易老化且涉及疫苗应用,代数控制更严格,需每 4 代验证增殖速度(确保~24 小时倍增)及 TNF alpha 促生长效果(增殖加速≥20%),确保实验重复性及疫苗适配性)
- 背景简介:人正常胚肺成纤维细胞经典细胞系,源自妊娠 3 个月女性胚胎肺组织,首株用于人类疫苗制备的人二倍体细胞系,MEM 培养基即可稳定生长,添加 TNF alpha 可促进增殖,无肿瘤细胞的致瘤性或激素分泌功能,是研究早期胚胎肺发育、疫苗生产工艺、TNF alpha 信号通路及药物毒性评价的理想模型;可与 MRC-5 对比探索性别 / 胎龄对胚肺成纤维细胞增殖及功能的影响(如疫苗生产效率差异),或与 JEG-3 构建 “正常胚胎 – 肿瘤” 细胞配对模型,评估疫苗佐剂对正常细胞的安全性及对肿瘤细胞的潜在影响,也可作为早期胚胎细胞与 MRC-5(晚期胎儿细胞)形成 “早期 – 晚期” 胚胎发育阶段对比。
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 贴壁培养瓶或 1mL 冻存管,复苏后存活率≥85%(高于 MRC-5、JEG-3 的 80%,适配短倍增细胞高活性特征;早期胚胎细胞复苏后适应快,48 小时内增殖率达 100%,需同步验证 TNF alpha 促生长功能(添加后 24 小时细胞数翻倍),确保核心特性未丢失)
- 支原体检测:无(避免污染干扰正常成纤维细胞增殖、疫苗制备工艺及 TNF alpha 调控实验,保障 “正常 – 肿瘤”“早期 – 晚期胚胎” 平行实验可靠性,与 MRC-5、JEG-3 的检测标准统一,无肿瘤细胞功能相关的污染叠加风险,适配疫苗生产级别的无菌要求)
- 保藏机构:ATCC; CCL-75、CRL-7728,ECACC; 90020107(国际权威机构保藏,疫苗制备用细胞特性及二倍体核型经多机构验证,与 MRC-5 的 ATCC; CCL-171、JEG-3 的多国际保藏形成互补,可追溯性强,适配疫苗研发实验的细胞身份确认,确保细胞来源符合 GMP 相关规范)
- 培养基:MEM+10% FBS+1% 双抗(核心配方与 MRC-5 的 “MEM+10% FBS+PS”、JEG-3 的 “90% MEM+10% FBS+PS” 相近,双抗成分(青霉素 + 链霉素)浓度明确,可与两者共用基础培养基(需统一双抗浓度)降低成本;血清选择低内毒素胎牛血清(≤5EU/mL,高于 MRC-5 的 10EU/mL 标准),适配疫苗生产的低污染风险要求;开封后 2 周内用完,MEM 培养基避免反复加热,防止破坏 TNF alpha 响应相关信号分子)
- 培养条件:95% 空气 + 5% 二氧化碳,37℃,湿度 70%-80%(与 MRC-5、JEG-3 培养环境参数一致,无需额外调整;早期胚胎细胞对温度波动敏感,培养箱控温波动需≤±0.2℃,避免影响短倍增特性;因增殖快需每 24 小时更换 1 次培养基,添加 TNF alpha 时需同步调整 pH 至 7.2-7.4,确保细胞因子活性)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(3×10⁶cells/mL,高于 MRC-5 的 2×10⁶cells/mL;4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮储存;冻存前需在含 TNF alpha 的培养基中培养 12 小时(增强细胞抗冻性),添加 10% FBS+5% DMSO(常规冻存液 DMSO 浓度 5%,低于 JEG-3 的 10%),降低早期胚胎细胞冻存损伤,复苏存活率比 MRC-5 高 5%-10%)
- STR 位点信息:Amelogenin:X(确认女性核型,与性别标注一致,区别于 MRC-5 的 “X,Y”、JEG-3 的 “X,Y”);CSF1PO:10,12;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:16,18;D19S433:13,16.2;D21S11:30,30.2;D2S1338:19,25;D3S1358:16,17;D5S818:10;D7S820:9,11;D8S1179:14;FGA:22,24;TH01:8,9.3;TPOX:8;vWA:19,20(含女性早期胚胎肺细胞特征性 STR 位点,可与 MRC-5、JEG-3 图谱对比确认身份,验证二倍体核型稳定性及性别特异性)
- 细胞货期:2 周左右(长于 MRC-5、JEG-3 的 1 周,因早期胚胎细胞培养及疫苗适配性验证流程更严格,需提前备货)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用);冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(与 MRC-5、JEG-3 限制条款一致,虽为疫苗制备用细胞,但不可用于临床治疗或人体干预实验,严禁用于生殖相关研究或未经审批的疫苗生产)
- 特别说明:① 功能验证:首次培养通过 STR 检测确认女性核型(Amelogenin:X),添加 TNF alpha(10ng/mL)验证增殖加速效果(24 小时细胞数≥初始 2 倍),镜检观察成纤维细胞形态占比(≥95%),确保细胞身份及核心特性稳定;② 培养注意:MEM 培养基需选择高糖型(葡萄糖 4.5g/L),双抗浓度需严格控制(青霉素 100U/mL + 链霉素 100μg/mL),避免影响疫苗相关蛋白表达;传代时需使用无酶吹打液辅助分散聚团细胞,减少对细胞表面受体的损伤(保障 TNF alpha 响应性);③ 实验适配:适合早期胚胎肺发育机制研究、疫苗生产工艺优化(如脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗)、TNF alpha 信号通路调控实验、药物毒性评价(作为疫苗佐剂安全性对照);可与 MRC-5 同步开展 “性别 / 胎龄对胚肺细胞增殖及疫苗生产效率的影响” 对比,或与 JEG-3 探索疫苗佐剂对正常细胞与肿瘤细胞的差异化作用,也可作为早期胚胎成纤维细胞模型用于细胞外基质合成(如胶原 I/III 分泌)的发育阶段差异研究。


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