一、细胞基本属性
- 细胞名称：WPMY-1 人正常前列腺基质永生化细胞（STR 鉴定正确）（与 VCaP、PC-3 等前列腺癌细胞形成 “正常基质 – 肿瘤细胞” 核心对照，且是前列腺基质细胞（非上皮细胞），区别于 RWPE-1（同来源前列腺上皮细胞），是研究前列腺基质 – 上皮细胞交互作用、肿瘤微环境调控的关键正常模型；可与 VCaP（脊椎转移癌）、PC-3（骨转移癌）组成 “基质 – 肿瘤” 共培养体系，探索前列腺癌转移过程中基质细胞的调控机制）
- 细胞别称：WPMY1；WPMY-1（别称简洁，以 “WPMY” 为核心标识，无复杂后缀，与 VCaP（“VCaP” 前缀）、PC-3（“PC” 前缀）形成前列腺细胞株的清晰区分，数字 “1” 便于实验记录及文献检索，贴合 “正常细胞 + 编号” 的命名体系，同时避免与其他 “WP” 前缀细胞（如肺细胞）混淆）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；54 岁（明确的中年男性背景，与 VCaP（推测中老年男）、PC-3（62 岁男）形成 “中年 – 老年” 年龄梯度，与 LNCaP（50 岁男）年龄相近，为前列腺正常基质细胞与肿瘤细胞的年龄匹配对照提供精准模型，适合研究年龄相关的基质 – 肿瘤交互作用差异）
- 组织来源：前列腺 / 基质（核心特色为正常前列腺基质组织来源，且与 RWPE-1 细胞（同来源前列腺上皮细胞）源自同一张成人前列腺组织切片的周围区域，保留正常前列腺基质细胞特有的 “分泌功能、细胞外基质合成、与上皮细胞交互作用” 特性；区别于所有前列腺癌细胞的肿瘤组织来源，可用于前列腺正常生理功能（如基质支持上皮分化）、肿瘤微环境（如基质细胞促进癌转移）研究，同时为临床前列腺基质相关疾病（如良性前列腺增生）提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞增殖节奏平缓，与正常基质细胞代谢特性匹配，贴壁强度高于 VCaP（贴壁差）、MDA-PCA-2B（贴壁差），低于 PC-3（贴壁稳定）；细胞生长无成簇或成团现象，呈均匀单层分布，传代操作可参考正常基质细胞通用流程，便于与肿瘤细胞同步开展共培养实验）
- 细胞形态：成肌细胞样（核心形态特色为成肌细胞样，呈长梭形，胞质细长，核呈椭圆形，排列呈平行或漩涡状，与所有前列腺癌细胞的 “上皮细胞样” 形态显著差异；与 RWPE-1（上皮细胞样）相比，形态是鉴别基质与上皮细胞的关键标志，可通过形态观察快速判断细胞纯度，避免与上皮细胞或肿瘤细胞交叉污染）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “正常基质特性、SV40 永生化稳定性、与 RWPE-1 的交互能力” 核心特征，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致特性漂移，如成肌细胞样形态丢失、分泌功能下降、与上皮细胞交互能力减弱）
- 背景介绍：WPMY-1 细胞与 RWPE-1 细胞同源于同一张成人前列腺组织切片的周围区域，通过 pRSTV 质粒导入 SV40 大 T 抗原实现永生化，核心特性及应用如下：①永生化与同源性特色：永生化过程可追溯（SV40 大 T 抗原介导），克服原代基质细胞传代次数有限的缺陷；与 RWPE-1 的同源性使其成为研究前列腺基质 – 上皮细胞交互作用的 “黄金配对” 模型，可模拟体内前列腺组织的基质 – 上皮结构；②安全性验证：同源细胞 RWPE-1 经检测乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒均为阴性，间接佐证 WPMY-1 细胞的生物安全性，降低实验感染风险；③应用场景：广泛用于前列腺正常基质功能研究（如分泌细胞因子调控上皮分化）、前列腺癌微环境机制研究（如基质细胞分泌因子促进 VCaP 脊椎转移）、基质 – 上皮共培养模型构建（与 RWPE-1），同时可与 PC-3（骨转移癌）搭配开展 “基质 – 骨转移癌” 共培养，探索骨转移过程中前列腺基质的远程调控作用。
- 生物安全等级：2（因含 SV40 大 T 抗原永生化背景，虽无传染性病毒，但存在外源基因潜在风险，生物安全等级与 VCaP（等级 2）一致，高于 PC-3、LNCaP 的等级 1；操作需在生物安全二级实验室进行，穿戴防护服、手套，使用带滤芯吸头，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟，避免外源基因扩散）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，且成肌细胞样形态、分泌功能无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%-80%，确保到达后可直接用于实验或传代，无需额外培养等待）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞生长及分泌功能，保障基质 – 肿瘤共培养实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CRL-2854；中国典型培养物保藏中心细胞库（国际权威机构（ATCC）与国内机构双重保藏，细胞来源可追溯，正常基质特性及永生化稳定性经过严格验证，与 VCaP（ATCC CRL-2876）、PC-3（ATCC CRL-1435）的保藏体系互补，便于跨地域实验协作及文献结果复现）
- 培养基：DMEM+5% FBS+1% 双抗（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用低血清（5% FBS）DMEM 培养基，区别于 VCaP（10% FBS DMEM）、PC-3（10% FBS F12K）；低血清配方适配正常基质细胞生长，避免高血清诱导细胞活化或分化，同时维持 SV40 大 T 抗原的稳定表达；②FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中细胞因子干扰基质细胞的正常分泌功能；③双抗终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞永生化特性及基质功能）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内托盘需水平放置，避免培养基倾斜导致细胞分布不均；与 VCaP、PC-3、LNCaP 等所有前列腺细胞培养条件完全一致，仅需在共培养实验中调整接种比例，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配正常基质细胞特性：①选择对数生长期细胞（贴壁均匀、无老化迹象），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3-4 分钟（长于肿瘤细胞），镜下见细胞间隙增大、梭形收缩即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎（保护成肌细胞样形态）；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 1×10⁶-2×10⁶cells/mL；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 DMEM 培养基重悬，直接接种，减少对基质细胞形态及功能的影响）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过低血清培养基适应性培养、成肌细胞样形态验证及与 RWPE-1 的交互能力预实验，确保正常基质特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，可与 VCaP、PC-3 同步下单，保障 “基质 – 肿瘤” 共培养实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免剧烈颠簸，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 37℃培养箱，24 小时后观察细胞贴壁情况，无需特殊静置处理，3 天内首次换液）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及永生化特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 VCaP、PC-3 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；因含 SV40 大 T 抗原，需遵守《基因工程安全管理办法》，实验操作及废弃物处理符合生物安全二级实验室要求）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①培养基与血清控制：严格使用 “DMEM+5% FBS+1% 双抗” 配方，不可与 VCaP 的 10% FBS DMEM、PC-3 的 10% FBS F12K 混用；低血清（5%）是维持正常基质细胞特性的关键，若使用 10% FBS 可能导致细胞活化（如 α-SMA 表达升高），影响与上皮细胞的交互功能；②共培养实验设计：与 RWPE-1（上皮细胞）开展基质 – 上皮共培养时，建议按 1:1 比例接种，使用 Transwell 小室（基质细胞种于下室，上皮细胞种于上室），培养 7-10 天观察上皮细胞分化情况；与 VCaP（肿瘤细胞）开展共培养时，可采用直接共培养（按 2:1 基质 – 肿瘤比例），检测基质细胞对肿瘤细胞侵袭能力（Transwell 实验）的影响，设置单独肿瘤细胞组作为对照；③形态与功能验证：实验前需通过免疫荧光检测成肌细胞标志物（如 desmin、vimentin），确认细胞基质身份，排除上皮细胞或肿瘤细胞污染；检测基质细胞分泌功能（如 IL-6、TGF-β）时，收集培养上清，用 ELISA 法检测，验证细胞功能稳定性；④与肿瘤细胞的对比实验：搭配 PC-3 开展 “正常基质 – 骨转移癌” 研究时，可：a. 检测基质细胞分泌的骨相关因子（如 OPG、RANKL）对肿瘤细胞骨黏附能力的影响；b. 对比不同转移部位肿瘤细胞（VCaP 脊椎转移、PC-3 骨转移）与基质细胞的交互作用差异，分析转移器官特异性的微环境机制；⑤长期培养监测：每 5 代检测成肌细胞样形态、SV40 大 T 抗原表达（Western Blot）及分泌功能，若发现形态梭形变圆、分泌因子下降，需立即更换低代数种子细胞，确保实验结果可靠。
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